ATP熒光細菌檢測儀的核心生化原理主要基于螢火蟲發(fā)光反應(yīng)的“熒光素酶—熒光素體系”。以下是對該原理的詳細解析:
一、ATP(腺苷三磷酸)概述
ATP是生物體內(nèi)能量代謝的關(guān)鍵分子,作為所有生物活細胞中普遍存在的能量分子,在細胞的各種生理活動中起著至關(guān)重要的作用。其含量的多少可以反映細胞的存活狀態(tài)和活性。
二、熒光素酶—熒光素體系
1.熒光素酶:這是一種能夠催化ATP分解的酶。在催化過程中,熒光素酶將ATP分解成ADP(二磷酸腺苷)和無機磷酸,同時釋放出能量。
2.熒光素:在熒光素酶的催化下,ATP釋放的能量被熒光素吸收,并使其從基態(tài)躍遷到激發(fā)態(tài)。當熒光素從激發(fā)態(tài)回到基態(tài)時,會釋放出熒光。
三、ATP熒光細菌檢測儀的工作原理
1.樣品處理:首先,通過ATP拭子擦拭樣品表面。拭子中含有裂解細胞膜的試劑,能夠?qū)⒓毎麅?nèi)的ATP釋放出來。
2.反應(yīng)與發(fā)光:釋放出的ATP與拭子中的特異性熒光素酶發(fā)生反應(yīng),生成光信號。這個光信號的強度與樣品中的ATP含量成正比。
3.熒光檢測:熒光檢測儀通過測量發(fā)光值,即熒光的強度,來確定樣品中微生物和生物殘留的數(shù)量。由于活細胞中的ATP含量相對恒定,因此發(fā)光強度可以直觀反映樣品中的生物負荷情況。
四、應(yīng)用與優(yōu)勢
ATP熒光細菌檢測儀在多個行業(yè)中具有廣泛應(yīng)用,尤其適合對衛(wèi)生要求嚴格、需要快速反饋的場景。其優(yōu)勢包括:
1.快速檢測:相比傳統(tǒng)的微生物培養(yǎng)方法,ATP熒光細菌檢測儀的檢測速度更快,通常只需數(shù)分鐘即可得出結(jié)果。
2.高靈敏度:該儀器能夠檢測到細胞內(nèi)極微量的ATP,從而對細胞活性進行精確的評估。
3.操作簡便:樣品處理和熒光檢測都是自動完成的,減少了人為誤差。
4.廣泛應(yīng)用:涵蓋了從食品安全到水質(zhì)監(jiān)控等多個行業(yè),用于檢測物體表面、手部衛(wèi)生、食品表面衛(wèi)生等情況下的微生物污染情況。
ATP熒光細菌檢測儀的核心生化原理是基于螢火蟲發(fā)光反應(yīng)的“熒光素酶—熒光素體系”,通過測量樣品中ATP的熒光強度來快速、直觀地判斷衛(wèi)生狀況和微生物污染程度。
